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離心管在細(xì)胞復(fù)蘇與轉(zhuǎn)移過程中的功能

時間:2025/4/29閱讀:228
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細(xì)胞復(fù)蘇和凍存講究“慢凍快溶",復(fù)蘇時一定要將凍存在液氮或-80℃中凝固的細(xì)胞凍存液快速融化至37℃,使胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。

●打開水浴鍋加熱至37℃。

● 超凈臺上放好離心管(離心管規(guī)格選用15ml的),細(xì)胞培養(yǎng)瓶,移液管,紫外滅菌至少20至30分鐘,吹風(fēng)5至10分鐘除去臭氧。

● 37℃預(yù)熱好要復(fù)蘇細(xì)胞的培養(yǎng)液,也可以不用預(yù)熱培養(yǎng)液,根據(jù)細(xì)胞情況選擇。

●向離心管中加約5至10ml培養(yǎng)液,從液氮罐或-80℃中取出凍存細(xì)胞,立即將凍存管放入37℃水浴中并輕輕搖動,待融化后(約2min即可)立即將解凍的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至含培養(yǎng)液的離心管中,800-1000rpm下離心5min,棄上清,加適量培養(yǎng)液輕輕吹打重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)移至細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,輕晃使瓶底液體分散均勻,標(biāo)好細(xì)胞名稱、代數(shù)、復(fù)蘇日期,顯微鏡下觀察后放入37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中。一般貼壁細(xì)胞過夜即可貼壁,換液和傳代時間根據(jù)不同細(xì)胞生長情況而定。


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