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CIA 膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型
膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型(CIA)實(shí)驗(yàn)方案1.牛II型膠原溶解在0.05mol/ml的乙酸中,濃度為2mg/ml,攪拌4°C過夜。2.注射前,II膠原溶液與同體積的IFA在冰浴中*乳化。3.*天,每只大鼠尾根部皮內(nèi)注射0.1mlCII/IFA乳化劑(濃度為1mg/ml)。4.第7天,每只大鼠以同樣的方式再次注射。5.注射后,大鼠關(guān)節(jié)炎指數(shù)根據(jù)肉眼評分系統(tǒng)每周兩次進(jìn)行評價(jià)。0-正常1-一個(gè)足爪腫脹和/或發(fā)紅2-2個(gè)相關(guān)關(guān)節(jié)腫脹和/或發(fā)紅3-2個(gè)相關(guān)關(guān)節(jié)腫脹和/或發(fā)紅4-整個(gè)足爪嚴(yán)重炎癥每只大小鼠關(guān)節(jié)炎 -
乳腺癌MCF-7細(xì)胞株裸鼠移植瘤模型:用含50U/ml慶大霉素、15%滅活小牛血清和10p-g/ml人胰島素的RPMI1640培養(yǎng)液,在370C和5%C02充分濕化條件下培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7備用。選30天齡BALB/cA雌性裸小鼠,體重為15~17g。每周2次腹腔注射苯甲酸雌二醇10mg/kg,持續(xù)2周。將人乳腺癌MCF-7細(xì)胞5×107接種于雌二醇處理過的裸小鼠右側(cè)腋窩皮下,建成人乳腺癌MCF-7裸小鼠移植瘤,接種后隔天腹腔注射苯甲酸雌二醇10mg/kg。移植瘤在裸小鼠體內(nèi)持續(xù)傳3代后
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http://www.genecool.com/?fromuser=%E6%9D%A8%E5%BB%BA%E8%BE%89圖解blast驗(yàn)證引物教程——以文獻(xiàn)報(bào)道的人類的ABCG2的引物為例1、進(jìn)入網(wǎng)頁:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/2、點(diǎn)擊BasicBLAST中的nucleotideblast選項(xiàng)3、完成2操作后就進(jìn)入了BasicLocalAlignmentSearchTool界面(1)在EnterQuerySequence欄中輸入引物序列:注:文獻(xiàn)報(bào)道A
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Real-time PCR實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
Real-timePCR實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中的一些好習(xí)慣加入試劑之前,把它混勻一下,以免放置時(shí)間長了濃度不均移液槍用完之后要?dú)w到zui大計(jì)量的位置,防止久而久之彈簧失去彈性一定要記著關(guān)水浴箱,切記切記多和大家討論,同時(shí)多關(guān)注別人討論的經(jīng)驗(yàn),這幾乎是zui快提高的捷徑了所有的試劑都自己配,出了問題才好找原因防止RNA酶污染的措施1.所有的玻璃器皿均應(yīng)在使用前于180℃的高溫下干烤6hr或更長時(shí)間。2.塑料器皿可用0.1%DEPC水浸泡或用氯仿沖洗(注意:有機(jī)玻璃器具因可被氯仿腐蝕,故不能使用)。3. -
簡并引物設(shè)計(jì)方法(實(shí)際操作步驟)
http://www.genecool.com/?fromuid=102401自己做過一些簡并引物,現(xiàn)將我利用生物信息學(xué)資源設(shè)計(jì)簡并引物的各個(gè)步驟作一個(gè)總結(jié),各位戰(zhàn)友可將各自的心得體會寫下,以便大家交流?。?!一、利用ncbi搜索不同物種中同一目的基因的蛋白或cDNA編碼的氨基酸序列因?yàn)槊艽a子的關(guān)系,不同的核酸序列可能表達(dá)的氨基酸序列是相同的,所以氨基酸序列才是真正保守的。首先利用NCBI的Entrez檢索系統(tǒng),查找到一條相關(guān)序列即可。隨后利用這一序列使用BLASTp(通過蛋白查蛋白),在整個(gè)Nr -
對于RNA的抽提質(zhì)量影響至關(guān)重要的幾個(gè)因素之一,是在RNA抽提之前如何處理樣本。這里我們可以看到一個(gè)小鼠肝組織樣本在室溫下分別放置2小時(shí),4小時(shí),過夜之后提取的RNA電泳圖。RNA在未處理的樣本中很快就降解了。你知道嗎?內(nèi)源RNase量在不同種類組織中差異極大。腦組織和心組織擁有相對zui低的內(nèi)源RNase,胸腺組織和胰腺組織擁有比腦組織多100,000倍內(nèi)源RNase。當(dāng)你著手樣本破裂均漿時(shí),請將以上因素考慮進(jìn)去,能在獲得樣本的zui初時(shí)間將富含RNase的樣本放入RNAlater保存液,以便
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BD MOSAIC,成分已知、無血清、完整的間充質(zhì)干細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)
訂貨hMSC培養(yǎng)問題*!hMSC生長太慢?-細(xì)胞倍增速度更快。在12天內(nèi),細(xì)胞可從一百萬個(gè)增加到十億個(gè)hMSC生長狀態(tài)不好?-在細(xì)胞傳代的整個(gè)過程中,都可維持免疫表型、多能性以及對T細(xì)胞的抑制能力操作繁瑣,信心不足?-即配即用,無需額外添加,傳代期間無需補(bǔ)充培養(yǎng)基難以挑選到合適的血清產(chǎn)品?-無血清,成分已知,批次間沒有差異樣本十分珍貴?-更低的zui小播種密度,低至3000個(gè)/cm2更高的臨床要求?-按照cGMP要求生產(chǎn),并提供藥品管理檔案(DrugMasterFile)http://www.b -
地高辛(DIG):高靈敏度的非放射性核酸標(biāo)記/檢測體系
羅氏應(yīng)用科學(xué)部(RocheAppliedScience)是zui早致力于向用戶提供非放射標(biāo)記技術(shù)的公司之一,讓更多的科研工作者們可以避免使用危險(xiǎn)的放射性同位素。自1995年羅氏的地高辛產(chǎn)品上市以來,盡管陸續(xù)有許多出色的競爭者涉足這一領(lǐng)域,盡管有定量PCR技術(shù)的應(yīng)用,DIG系統(tǒng)仍然是非放射性標(biāo)記—檢測技術(shù)的,被廣泛地應(yīng)用各種膜雜交及原位雜交技術(shù)中。技術(shù)原理:地高辛標(biāo)記技術(shù)源于一種從洋地黃類植物(毛地黃和毛花毛地黃)中提取的類固醇(Steroid)物質(zhì)——Digoxigenin(DIG),在醫(yī)學(xué)上可