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手把手教會您如何正確校正紫外可見分光光度計!

閱讀:1866      發(fā)布時間:2022-9-23
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  對于紫外可見分光光度計而言在使用前必須要做基線校正,對于此項(xiàng)工作的原理和操作方法許多使用者的認(rèn)識不盡相同;為此談?wù)勎覀兊恼J(rèn)識。
  1、為何要做基線校正?
  大家都知道,紫外可見分光光度計的光學(xué)系統(tǒng)基本是由光源、單色器、檢測器等三部分組成的。在我們使用的波長區(qū)域中,上述部件在不同的波長下的響應(yīng)值均不相同;通俗地說、即使沒有樣品,儀器如果不做基線校正,那么在190nm至1100nm的范圍中,吸光值或透過率不會是一條直線,這是一種客觀的物理現(xiàn)象。

 

  2、被校正的基線種類和用途:
 ?、傧到y(tǒng)基線:
  所謂系統(tǒng)基線就是儀器固有的波長范圍的總基線;例如一臺紫外可見分光光度計出廠設(shè)計的波長全程范圍是190nm至1100nm,那么它的系統(tǒng)基線就是這個范圍。一般來講,作為分析人員對一臺儀器做全程掃描測試是比較少見的;之所以要做系統(tǒng)基線的目的一般是將儀器的光學(xué)系統(tǒng)的響應(yīng)值校正到基本一致;這就類似馬拉松賽跑一樣,只要大家在同一起跑處比賽,前后差幾米出發(fā)無所謂。
 ?、谟脩艋€:
  所謂用戶基線就是分析者自己設(shè)定的測量波長區(qū)域的一段基線;由于這是分析所需要的區(qū)域,為了保證測試的準(zhǔn)確性,故用戶基線的校正是非常重要和必要的;這就類似百米賽跑一樣,運(yùn)動員要在同一個起跑線上比賽而不能搶跑,否則無法準(zhǔn)確計算成績。

  3、基線校正的方法
 ?、傧到y(tǒng)基線:
  系統(tǒng)基線的校正較為簡單,一般情況下樣品室內(nèi)不放樣品,僅做光學(xué)系統(tǒng)的校正;如果一定要使用全波段的測量那另當(dāng)別論。同時需要注意的是:系統(tǒng)基線無需經(jīng) 常校正,一般半個月或一個月校正校正一次即可。對有的儀器來說,系統(tǒng)基線校正過于頻繁反而會造成基線漂移嚴(yán)重。
  ②用戶基線校正方法:
  兩只比色杯盛有空白溶液分別放置在樣品及參比光路中,校正波長范圍要大于分析波長范圍;例如、分析設(shè)定范圍為220nm-500nm,那么校正波長就要設(shè)定為210nm-510nm;等待校正結(jié)束后再將波長設(shè)定回到原來的220nm-500nm范圍。

  4、基線校正的注意事項(xiàng):
 ?、倩€校正時要保證紫外可見分光光度計有一定的預(yù)熱時間;
 ?、诿扛鼡Q一種參比溶液后均要重新做基線校正;
 ?、廴绻麉⒈热芤旱奈舛却笥跇悠返奈舛戎禃r測試結(jié)果會出現(xiàn)負(fù)值,此時要考慮使用何種溶液做基線校正了。

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