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隨著越來(lái)越多的CAR-T療法批準(zhǔn)，CAR-T生產(chǎn)工藝仍然面臨很多挑戰(zhàn)。起始材料復(fù)雜性就是其中很大的一點(diǎn)，接受CAR-T治療的患者之前可能接受過(guò)放療或化療，而這會(huì)導(dǎo)致他們的細(xì)胞處在功能低下、不健康的狀態(tài)。
如何從復(fù)雜的原材料起始又能穩(wěn)定收獲高質(zhì)量的細(xì)胞，我們認(rèn)為在培養(yǎng)基的選擇上是至關(guān)重要的。
這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)比較了市面上的4種培養(yǎng)基，在IL-2和CD3/28刺激下培養(yǎng)PBMC。
CFSE熒光染料檢測(cè)淋巴細(xì)胞增殖
圖1：在X-VIVO、 A、T、O 培養(yǎng)基中培養(yǎng)4天的T細(xì)胞增殖比較。細(xì)胞增殖表現(xiàn)為細(xì)胞+培養(yǎng)基對(duì)照組的CFSE倍數(shù)變化。Donor=3
從比較中可以看出X-VIVO和 A培養(yǎng)基可以支持更好的細(xì)胞擴(kuò)增。但細(xì)胞數(shù)量不是僅有的評(píng)判指標(biāo)。科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)，T細(xì)胞表型是治療效果的重要指標(biāo)，通過(guò)觀察特定的細(xì)胞表面標(biāo)記物，可以幫助選擇對(duì)治療有效的細(xì)胞亞群。CD45RO+ T細(xì)胞浸潤(rùn)與總生存率（OS）和無(wú)病生存率（DFS）的改善顯著相關(guān)。
第0天和第4天的CD45RA和CD45RO亞型占總T細(xì)胞群的百分比
圖2：在X-VIVO、A、T、O 培養(yǎng)基中培養(yǎng)4天后活力變化，并通過(guò)FACS表型分析評(píng)估PBMC（T細(xì)胞）的分化。Donor=3
T細(xì)胞在培養(yǎng)早期自然會(huì)經(jīng)歷生存能力下降，這就是為什么大多數(shù)過(guò)程必須超過(guò)7-10天。X-VIVO可以提高初始階段的細(xì)胞活率縮短培養(yǎng)過(guò)程，并讓收獲的細(xì)胞擁有更好表型。
這項(xiàng)研究表明，在市場(chǎng)上的標(biāo)準(zhǔn)無(wú)血清培養(yǎng)基中，X-VIVO培養(yǎng)基的性能優(yōu)于競(jìng)爭(zhēng)對(duì)手，即增殖周期較短，并收獲更多的CD45RO+T細(xì)胞用于CAR-T治療。
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