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亞科因(武漢)生物技術(shù)有...

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DMEM 高糖培養(yǎng)基:即用型細胞培養(yǎng)解決方案

閱讀:267      發(fā)布時間:2025-5-8
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在哺乳動物細胞培養(yǎng)中,選擇合適的培養(yǎng)基對于細胞的生長和功能維持至關(guān)重要。DMEM 高糖培養(yǎng)基(含 10% 血清,1% 雙抗)以其全面的營養(yǎng)成分和即用型配方,成為眾多細胞培養(yǎng)場景的理想選擇。

一、DMEM 高糖培養(yǎng)基的配方與特點

即用型配方,便捷高效

DMEM 高糖培養(yǎng)基經(jīng)過精心配制,已包含 10% 胎牛血清和 1% 雙抗(青霉素 - 鏈霉素溶液),無需額外添加成分,開瓶即可直接用于細胞培養(yǎng)。這種即用型設(shè)計大大簡化了實驗前的準(zhǔn)備工作,減少了因配制培養(yǎng)基帶來的誤差和污染風(fēng)險,特別適合那些對時間敏感的實驗和需要快速啟動培養(yǎng)的場景。

營養(yǎng)全面,支持細胞生長

DMEM 培養(yǎng)基本身含有豐富的營養(yǎng)成分,包括各種氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和葡萄糖。與 MEM 相比,DMEM 增加了多種成分的用量,尤其是葡萄糖含量高于 4,500mg/L,為細胞提供了充足的能源供應(yīng)。10% 胎牛血清的添加進一步豐富了培養(yǎng)基中的生長因子和細胞黏附因子,支持細胞的快速增殖和健康生長。1% 雙抗成分則有效抑制細菌和真菌的生長,降低培養(yǎng)過程中的污染風(fēng)險。

二、DMEM 高糖培養(yǎng)基的應(yīng)用范圍

廣泛適用于多種細胞類型

DMEM 高糖培養(yǎng)基適用于多種哺乳動物細胞的培養(yǎng),包括但不限于成纖維細胞、神經(jīng)元細胞、神經(jīng)膠質(zhì)細胞、平滑肌細胞等原代細胞,以及常見的細胞系如 HeLa、293、Cos-7 和 PC-12 等。對于生長速度快、粘附性低的細胞系,如雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA 轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞等,該培養(yǎng)基能夠提供理想的生長環(huán)境,促進細胞的旺盛生長和穩(wěn)定傳代。

滿足多種研究和生產(chǎn)需求

在生物制藥領(lǐng)域,DMEM 高糖培養(yǎng)基被廣泛用于疫苗生產(chǎn)和重組蛋白表達。例如,利用 CHO 細胞生產(chǎn)重組人促紅細胞生成素(EPO)和乙肝疫苗等。其高糖配方為細胞的高密度培養(yǎng)和生產(chǎn)過程提供了充足的能源,有助于提高產(chǎn)物的產(chǎn)量和質(zhì)量。在基礎(chǔ)研究中,該培養(yǎng)基為細胞的長期培養(yǎng)、基因轉(zhuǎn)染、藥物篩選等實驗提供了穩(wěn)定的培養(yǎng)平臺。

三、DMEM 高糖培養(yǎng)基的操作使用方法

儲存與準(zhǔn)備

DMEM 高糖培養(yǎng)基應(yīng)保存在 4℃左右的低溫環(huán)境中,避免光照直射和溫度波動過大。在使用前,將培養(yǎng)基從冰箱中取出,使其恢復(fù)至室溫,以確保細胞在接種時不會因溫度驟變而受到應(yīng)激。

細胞培養(yǎng)步驟

  1. 細胞接種:根據(jù)細胞類型和實驗需求,將細胞以適當(dāng)?shù)拿芏冉臃N到培養(yǎng)容器中。對于貼壁細胞,可以使用培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板;對于懸浮細胞,通常使用搖瓶或懸浮培養(yǎng)袋。

  2. 培養(yǎng)條件:將接種后的細胞放入細胞培養(yǎng)箱中,設(shè)置溫度為 37℃,濕度保持在 95% 以上,二氧化碳濃度為 5% 左右。這些條件有助于維持培養(yǎng)基的 pH 值穩(wěn)定,為細胞提供一個適宜的生長環(huán)境。

  3. 定期換液:根據(jù)細胞的生長速度和代謝需求,定期更換培養(yǎng)基,一般每 2 - 3 天更換一次。換液時,吸出舊的培養(yǎng)基,用適量的 PBS 或無菌生理鹽水輕輕沖洗細胞,再加入新鮮的 DMEM 高糖培養(yǎng)基。

  4. 觀察與記錄:在細胞培養(yǎng)過程中,定期使用倒置顯微鏡觀察細胞的形態(tài)和生長狀態(tài),記錄細胞的生長曲線和分裂情況。注意觀察細胞的貼壁情況、細胞密度和細胞形態(tài)是否正常。

后續(xù)處理

當(dāng)細胞生長達到實驗要求的密度或狀態(tài)時,可以進行下一步實驗操作。對于需要長期保存的細胞,可以將細胞凍存于液氮中。凍存時,使用含 10% DMSO 的凍存培養(yǎng)基,將細胞懸浮液分裝到凍存管中,放入程序降溫盒中逐步降溫,最終保存于液氮罐中。



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