超微量分光光度計作為常用的核酸、蛋白等生物大分子的定量和表征工具，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)和生物制藥等領(lǐng)域，用戶僅需微量樣品即可快速獲得濃度及吸光度結(jié)果。然而在日常使用中，一些用戶會對測量結(jié)果有疑慮，尤其是當(dāng)測量結(jié)果與預(yù)估的結(jié)果出現(xiàn)較大差異，或與使用其他方法的定量結(jié)果有差異時，用戶往往會懷疑設(shè)備出現(xiàn)問題或故障。其性能檢查是確保儀器準確性和可靠性的重要步驟，以下是對超微量分光光度計性能檢查的一些建議：
一、檢查前的準備
1、確保儀器處于穩(wěn)定狀態(tài)：檢查儀器是否放置平穩(wěn)，避免震動和干擾。
2、檢查光源：確保光源（如氙氣閃光燈）正常工作，無閃爍或亮度不均現(xiàn)象。
3、檢查檢測器：確保檢測器靈敏度高，能夠準確檢測微弱光信號。
4、校準儀器：使用標準溶液（如重鉻酸鉀標準溶液）進行校準，確保儀器測量結(jié)果的準確性。
二、性能檢查
1、標準品測量
常用的標準品可使用BSA或核酸標準品，可從各試劑廠家購買，或使用如BCA定量試劑盒，QUBIT核酸定量試劑盒中的標準品。請注意標準品一定要在效期之內(nèi)，且保存得當(dāng)（通常低溫）。也可以使用設(shè)備廠家提供的小分子化合物標準品，如Implen提供的PHP標準品。標準品是有等級區(qū)分的，通常附帶有檢定證書的標準品，標稱濃度會更準確。 特別指出的是，使用未知濃度的樣品，來評估不同設(shè)備的測量結(jié)果，并以其中一臺作為基準，判定另外一臺的準確性，是錯誤的。
2、重復(fù)性測量
在缺乏標準品，或標準品由于保存不當(dāng)狀態(tài)已存疑時，可使用未知濃度樣品做重復(fù)性測試。這可以判斷設(shè)備的穩(wěn)定性，以排除一些潛在問題，如樣品臺損壞、樣品的非均質(zhì)，成分干擾等。雖然不能確定準確性誤差，但重復(fù)性很好的設(shè)備，很大幾率是沒有大問題的。當(dāng)然，這需要結(jié)合您的允差要求，綜合考量。
3、梯度稀釋測量
使用已知濃度或未知濃度的樣品，均可進行梯度稀釋測量，以驗證設(shè)備的線性穩(wěn)定性。使用設(shè)備的標準曲線功能可便捷地完成此項測試，并給出線性回歸。當(dāng)梯度稀釋的R2趨近于1，設(shè)備的線性可滿足廣泛的動態(tài)范圍內(nèi)的測量要求，同時也可反映設(shè)備的良好狀態(tài)。需要注意的是，梯度稀釋時一定要選擇定期校準過的，準確性好的移液器，且正確操作。
4、基線穩(wěn)定性測量
光源和CCD檢測器，作為設(shè)備的核心組件，其穩(wěn)定性對于設(shè)備而言是非常重要的，而基線測量可以很好地反映這些部件的狀態(tài)。使用水（或空氣）作為空白，并且用水（或空氣）作為樣品，做多次重復(fù)測量，如果吸光值的漂移很小，通?？煞从吃O(shè)備的光學(xué)系統(tǒng)組件狀態(tài)正常。
三、性能檢查后的處理
1、記錄檢查結(jié)果：詳細記錄各項性能檢查的結(jié)果和數(shù)據(jù)，以便后續(xù)分析和比較。
2、分析檢查結(jié)果：對檢查結(jié)果進行分析和評估，判斷儀器是否滿足使用要求。
3、調(diào)整或校準儀器：根據(jù)檢查結(jié)果，對儀器進行調(diào)整或校準，確保儀器處于最佳工作狀態(tài)。
4、制定維護計劃：根據(jù)儀器的使用情況和性能檢查結(jié)果，制定定期維護和保養(yǎng)計劃，延長儀器的使用壽命和保持其準確性。
超微量分光光度計的性能檢查是確保其準確性和可靠性的重要步驟。通過全面的性能檢查，可以及時發(fā)現(xiàn)并解決問題，確保儀器在科研和實驗中的準確性和可靠性。
